狗狗卵子能存活多久?
这个答案来自我一位喜欢做实验的朋友,他以前做过这方面的研究,于是找到了我们实验室,让我们帮他一起完成这个项目(真是难为这位朋友了)。 首先,我们要找到供体狗和受体狗。为了保证实验的结果可靠,通常选用同一个物种的雌性动物和雄性动物来做实验。因为同种动物之间的抗体水平比较接近,不容易出现免疫反应而导致实验失败。同时,为保证实验结果的唯一来源,避免交叉污染,实验人员还需要对动物进行标记,比如给动物注射含有特定标记物的血清或卵黄蛋白原以识别不同动物的细胞、器官和组织。
在取得合格的供体狗和受体狗之后,实验人员需要采集它们的血液样本,用来检测抗精子抗体的浓度。接下来,实验人员需要用针管抽取一定量的卵细胞,备用。 对犬类来说,取卵的位置一般在卵巢上。由于腹腔内的器官有很多,为了避免误伤其他器官,通常在超声引导下,由腹部皮肤上的小切口,吸取卵母细胞。对于大型的动物,可以直接剖腹取卵。 对于小型动物来说,取一个卵细胞并不算困难;但对于大型动物,每次只能取到一个卵细胞。如果连续几天都没有发现卵细胞或者已经采集到了足够的卵细胞,则实验终止。
为了培养液中的营养能够被卵细胞吸收,研究人员还会将培养液加入等量的胎牛血清。当卵细胞进入培养皿后,试剂的混合液会被轻轻搅拌,以使所有的卵细胞都能接触到混合液。 一个理想的受精环境是这样的:温度保持在37℃左右,并且处于饱和溶液中,这样才能够保证精子和卵细胞能够保持活性。 一般情况下,精子的数量会多于卵细胞,所以会看到许多浮游的精子颗粒。此时,将预先收集的一批卵细胞放入培养皿中,轻摇培养液,使得精子和卵细胞充分接触。 如果精子和卵细胞可以顺利结合,则在培养液中会逐渐观察到细胞游动。这个时候,可以将培养液进行离心,提取第一层细胞浆部分。这就是早期胚胎。
最后,将提取到的细胞浆注入事先清洗干净的玻璃纤维膜内,封好,再让它们在培养液里浸泡10分钟。 这样做既可以让细胞完全浸润到液体中并得到充足的营养,又可以防止细胞从纤维膜的缝隙间泄露,以免对以后的实验造成干扰。 整个实验过程其实还有很多细节需要注意,以上只是简单的介绍。如果感兴趣的话,可以在我的专栏里阅读完整的内容。